基因工程乙肝病毒表面抗原纯化工艺研究

基因工程乙肝病毒表面抗原（ｒＨＢｓＡｇ）是由重组哺乳动物细胞ＣＨＯ系分泌表达的,经过纯化制备基因工程乙肝疫苗。目前在国际上,对从ＣＨＯ细胞培养液中分泌的ｒＨＢｓＡｇ,纯化工艺主要采用多步柱层析和超滤技术,而在国内,ＣＨＯ系ｒＨＢｓＡｇ的大规模生...     

果树介壳虫寄生蜂资源的研究

介壳虫是果树的重要害虫,研究利用寄生蜂的自然控制作用是果树介壳虫生物防治和综合治理的重要途径。本论述了果树介壳虫寄生蜂资源的研究,报道了小蜂总科寄生蜂5科25属63种。     

金黄色葡萄球菌spa基因在大肠杆菌中受多启动子调控

利用重组ＤＮＡ技术在大肠杆菌中克隆并表达了金黄色葡萄球菌Ａ蛋白ＳｐＡ。在Ｅ。ｃｏｌｉ ＲＲ１中ＳｐＡ的表达量随培养温度的升高而增加,４２℃的表达量是２３℃的６倍,但该在热休克应答缺陷的Ｅ．ｃｏｌｉ ＣＡＧ５９７及ＣＡＧ６２７中却消失。当删除ｓｐａ基因上游的一段序列后,仍有ＳｐＡ表达,但其表达量的热休克效应在Ｅ．ｃｏｌｉＲＲ１中也消失。这表明被删除的序列后,仍有ＳｐＡ表达,但其表达量的热休克效应在Ｅ     

四种植物粘液繁殖体粘液的比较研究

对百里香(Thymus serpyllum)、平车前(Plantago depressa)、盐生车前(P．maritima)、野亚麻(Linum stelleroides)进行了粘液繁殖体粘液情况比较．以在水浸和浇水条件下植物种子粘沙量的多少衡量粘液量．结果表明,对于不同浸水时间处理,野亚麻和平车前未表现明显差异,盐生车前和百里香有随浸泡时间加长而粘液溶出量增多的趋势．对于不同浇水量处理,4种植物均有随浇水量增多而粘液增多的倾向．浸泡80min后,盐生车前种子的粘液粘沙使重量达原重的60多倍,平车前种子达原重的10倍左右,百里香和野亚麻种子达原重的4～6倍左右．浇水8mm后,盐生车前种子的粘液粘沙使重量达原重的20多倍,平车前种子达原重的6～10倍左右,百里香和野亚麻种子达原重的2～7倍左右．将各种处理平均,得到各种植物粘沙种子百分率为：野亚麻67．7％,百里香94．5％,平车前97．7％,盐生车前99．5％．     

马传染性贫血病毒强、弱毒株dUTPase结构与酶活性比较

为研究尿嘧啶脱氧核糖核苷三磷酸酶(dUTPase)在马传染性贫血病毒(equine infectous anemia virus,EIAV)致弱过程中的作用,探索dUTPase结构与功能的关系,分别对EIAV强、弱毒株dUTPase的编码基因进行了结构分析,并在大肠杆菌中进行了表达.经镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)金属亲合层析方法对表达产物纯化后,用3H标记底物的方法测定了重组强、弱毒株dUTPase的活性.证明所表达的两种重组dUTPase均具有水解dUTP的功能,但重组弱毒株dUTPase的活性显著高于重组强毒株dUTPase的活性.结果提示,由于EIAV疫苗株在驴白细胞上连续传代培养,使病毒dUTPase的活性增强和复制能力提高,而决定酶活性改变的分子基础是dUTPase编码基因中的两个氨基酸发生了突变.此结果对其它慢病毒病的免疫预防具有重要参考价值.     

高压氧对体外培养的成骨细胞增殖和分化的影响

为探讨高压氧对成骨细胞增殖和成骨分化的影响,把来源于牙槽骨的成骨细胞接种在24孔培养皿中,每孔2 500个细胞,4个治疗组分别接受不同条件的高压氧治疗,分别是2.4ATA 90 min,2.4ATA 30 min,1.5ATA 90 min和1.5ATA30 min,每天一次,共10天.对照组进行常规的细胞培养.分别在高压氧治疗前和高压氧治疗后的1、2、3、4、6、8、10天,采用WST-1分析试剂进行成骨细胞的增殖分析.使用乳酸脱氢酶(LDH)毒性分析法检测高压氧对成骨细胞的毒性影响.另将细胞接种于96孔培养皿中,每孔10 000个细胞,正常培养3天后,改用成骨化培养基,24h后,两个治疗组分别接受2.4ATA 90 min和1.5ATA 90 min的高压氧治疗,每天一次共19次.采用钙沉积分析法、碱性磷酸酶(ALP)活性分析和Von Kossa染色进行成骨分析.同样的方法观察高压空气对细胞增殖和分化的影响.结果显示,在10%小牛血清培养基条件下,高压氧刺激了成骨细胞的增殖,而在使用2%小牛血清培养基时,并末观察到高压氧对细胞增殖的促进作用.高压氧治疗前后细胞外乳酸脱氢酶含量没有发生改变,提示了高压氧未对成骨细胞造成毒性影响.另一方面,高压氧增加了骨结节的形成,同时钙沉积增加,碱性磷酸酶的活力也显著增强,表明了高压氧促进了成骨细胞的成骨分化.     

东灵山辽东栎虫损种子调查

2000年8月底至9月底,在北京东灵山地区小龙门林场对2块辽东栎样地中虫损种子下落动态进行了调查.结果表明:2块样地辽东栎种子产量分别高达19.15和91.23颗·m-2,而2块样地虫损种子较多,分别为49.23和33.38个·m-2,所占种子库比例分别为36.93%和25.96%;1999年研究发现(阎文杰,2000),2样地辽东栎种子产量为13.09和7.24颗·m-2,其中虫损种子产量为10.87和5.90颗·m-2,虫损率高达82.22%和75.43%.2年的观察结果均证实虫损种子在种子雨早期迅速下落,且低产年份的虫损种子在种子库中的比例显著高于高产年份.高比例的虫损种子可能是导致辽东栎实生苗更新率低的重要因素.     

光肩星天牛体内纤维素酶活性及其与寄主选择的关系（英文）

为了揭示光肩星天牛Anoplophora glabripennis Motschulsky纤维素酶与寄主选择的关系, 以4种不同寄主树种（新疆杨Populus alba var. pyramidalis Bunge、箭杆杨Populus nigra var. thevestina (Dode) Bean、合作杨Populus simonii × Populus pyramidalis cv. opera Hsu和漳河柳Salix matsudana f. lobato-glandulosa Faug et Liu来源的光肩星天牛幼虫, 和以取食5种不同树种（臭椿Ailanthus altissima、毛白杨Populus tomentosa、合作杨、旱柳Salix matsudana Koidz.和复叶槭Acer negundo Linn.）的光肩星天牛成虫为实验对象, 测定其纤维素酶活性。结果表明: 不同寄主来源的光肩星天牛幼虫内切-β-1,4-葡聚糖酶活性在1.36~2.71 μmol葡萄糖/ (g FW·h)之间, β-葡萄糖苷酶活性在2.57~4.86 μmol葡萄糖/(g FW·h)之间;取食不同树种的光肩星天牛成虫内切-β-1,4-葡聚糖酶活性在4.08~9.27 μmol葡萄糖/(g FW·h)之间, β-葡萄糖苷酶活性在2.87~6.08 μmol葡萄糖/ (g FW·h)之间。不同寄主树种来源的光肩星天牛幼虫体内纤维素酶活性无显著性差异, 取食与否以及取食树种的不同对光肩星天牛成虫纤维素酶活有较大影响。     

微生物课程中思政元素的挖掘与应用

作为一种新的综合教育理念和课程观,课程思政是高校培养德智体美全面发展的社会主义建设者和接班人的必然之举.文章就课程思政在"微生物学"课程中的教学实践,从专业课程中进行课程思政的重要性、微生物学专业课中课程思政元素的挖掘以及如何将思想政治教育在微生物学课程中有效实施进行了探讨,以确保以微生物学教学目标为立足点,自然恰当地...     

小鼠Sema4D慢病毒过表达载体的构建与鉴定

目的构建小鼠Sema4D慢病毒过表达载体。方法采用Gateway技术将体外合成小鼠全长Sema4D基因插入并重组到预先已经插入荧光标记基因片段IRES的质粒中,阳性菌落由Ampicillin筛选后,大量繁殖,获得大量转染后的质粒,经过测序鉴定后,经慢病毒包装,转染293T细胞,经由Neomycin筛选,获得高滴度的病毒液。结果测序结果显示Sema4D基因共有2 586 bp,重组慢病毒载体共有11 966bp,其中Sema4D插在CMV启动子和IRES标记序列之间,位置为2569-5144。测序结果表明小鼠Sema4D基因已经成功构建到过表达慢病毒载体中。结论小鼠Sema4D基因慢病毒过表达载体Lenti-CMV-sema4D-IRES-PGK-neo能够正确构建,该载体为研究小鼠Sema4D基因在特定细胞内过表达株的筛选奠定基础,为其作用机制的研究提供用力工具。